Mise au point de méthodes de recherche large de xénobiotiques par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem

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Book Synopsis Mise au point de méthodes de recherche large de xénobiotiques par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem by : Tiphaine Robin

Download or read book Mise au point de méthodes de recherche large de xénobiotiques par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem written by Tiphaine Robin and published by . This book was released on 2020 with total page 0 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Dans de nombreux contextes de toxicologie clinique, le screening ou criblage toxicologique est la première analyse effectuée chez un patient, lorsque la nature ou la présence même de médicaments ou de toxiques est totalement inconnue. Le plus souvent, le screening précède la mise en œuvre de méthodes quantitatives spécifiques. Les méthodes d'extractions peuvent être diverses mais celles-ci restent en général manuelles.Les objectifs de nos travaux étaient de développer des méthodes de screening qualitatives, quantitatives et automatisées avec un spectromètre de masse en tandem (modèle 8060 ; Shimadzu) et une préparateur automatisé d'échantillons (CLAM-2000 ; Shimadzu).Des bibliothèques regroupant les paramètres spectraux et chromatographiques d'environ 1 300 molécules d'intérêt en toxicologie ont été construites. Sur la base de ces bibliothèques plusieurs méthodes de screening faisant appel à différents modes d'acquisition spectrales ont été développées et évaluées (MTS, MRM, MRM-SpM,...). Différentes méthodes d'extraction ont été également mises en place : préparation manuelle basée sur l'utilisation des sels QuEChERS et approche entièrement automatisée grâce au CLAM-2000.Ses approches ont été appliquées à des échantillons réels et ont vu leurs performances comparées à celles de méthodes déjà accréditées selon les exigences de la norme ISO-15189. Elles pourraient notamment être positionnées comme des méthodes de première ligne pour des laboratoires travaillant 24h/24 7j/7, dans un contexte d'urgence.

ANALYSE DES XENOBIOTIQUES INCORPORES DANS LES CHEVEUX PAR CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE COUPLEE A LA SPECTROMETRIE DE MASSE. APPLICATIONS EN TOXICOLOGIE CLINIQUE ET MEDICO-LEGALE

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Book Synopsis ANALYSE DES XENOBIOTIQUES INCORPORES DANS LES CHEVEUX PAR CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE COUPLEE A LA SPECTROMETRIE DE MASSE. APPLICATIONS EN TOXICOLOGIE CLINIQUE ET MEDICO-LEGALE by : VINCENT.. CIRIMELE

Download or read book ANALYSE DES XENOBIOTIQUES INCORPORES DANS LES CHEVEUX PAR CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE COUPLEE A LA SPECTROMETRIE DE MASSE. APPLICATIONS EN TOXICOLOGIE CLINIQUE ET MEDICO-LEGALE written by VINCENT.. CIRIMELE and published by . This book was released on 1996 with total page 198 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: L'ANALYSE DES CHEVEUX S'AVERE EXTREMEMENT RICHE D'INFORMATIONS PUISQU'ELLE AUGMENTE DE MANIERE CONSIDERABLE LA DUREE DE DETECTION DES XENOBIOTIQUES DANS L'ORGANISME. EN EFFET, LES CHEVEUX INCORPORANT LORS DE LEUR CROISSANCE (1 CM/MOIS ENVIRON) LES XENOBIOTIQUES CIRCULANTS, IL EST POSSIBLE DE LES METTRE EN EVIDENCE SUR DES PERIODES BEAUCOUP PLUS LONGUES (LE FACTEUR LIMITANT ETANT LA LONGUEUR DE LA MECHE), ALORS QUE DANS LE SANG ET LES URINES, LA FENETRE DE DETECTION EST DE QUELQUES HEURES A QUELQUES JOURS. TOUT AU LONG DE CE TRAVAIL, NOUS AVONS MIS AU POINT DES METHODES D'ANALYSE ORIGINALES PERMETTANT LA DETECTION DE DIVERS XENOBIOTIQUES INCORPORES DANS LES CHEVEUX, ESSENTIELLEMENT DES STUPEFIANTS TELS QUE L'HEROINE, LA COCAINE, LES AMPHETAMINES, LE CANNABIS ET LEURS METABOLITES RESPECTIFS, MAIS AUSSI DES MOLECULES DE SUBSTITUTION (METHADONE, BUPRENORPHINE), PLUSIEURS MEDICAMENTS DE LA PHARMACOPEE (BENZODIAZEPINES, ANTIDEPRESSEURS, ETC) ET CERTAINS PESTICIDES. LES MULTIPLES APPLICATIONS EN TOXICOLOGIE CLINIQUE (EXPOSITION IN UTERO, SUIVI MEDICAL, DIAGNOSTIQUE CLINIQUE), EN MEDECINE LEGALE (INTOXICATIONS MEDICAMENTEUSES) ET DANS LA SURVEILLANCE DES CONDUITES TOXICOPHILES AUXQUELLES CES METHODES ONT DONNE LIEU CONSTITUENT, A CET EGARD, UNE ILLUSTRATION COMPLEMENTAIRE DE L'INTERET DES TECHNIQUES D'ANALYSE MISES AU POINT

Procédure de recherche large ("screening") de xénobiotiques dans le sérum par chromatographie liquide - électrospray - spectrométrie de masse, appliquée à la toxicologie humaine

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Book Synopsis Procédure de recherche large ("screening") de xénobiotiques dans le sérum par chromatographie liquide - électrospray - spectrométrie de masse, appliquée à la toxicologie humaine by : Nicolas Venisse

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Application du couplage chromatographie liquide-spectrométrie de masse à l'étude de la biodisponibilité de peptides issus de produits laitiers et à la protéomique

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Book Synopsis Application du couplage chromatographie liquide-spectrométrie de masse à l'étude de la biodisponibilité de peptides issus de produits laitiers et à la protéomique by : François Delalande

Download or read book Application du couplage chromatographie liquide-spectrométrie de masse à l'étude de la biodisponibilité de peptides issus de produits laitiers et à la protéomique written by François Delalande and published by . This book was released on 2003 with total page 252 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Le couplage chromatographie liquide-spectrométrie de masse est devenu une méthode de choix pour la quantification de molécules dans une matrice, la détermination des séquences primaires de peptides et de protéines ainsi que la mise en évidence de modifications post-traductionnelles. Les progrès réalisés tant au niveau de la LC qu'au niveau de la spectrométrie de masse ont aussi révolutionné la biologie en permettant une identification sur des quantités femtomolaires de protéines séparées par électrophorèse bidimensionelle dans le cadre d'études protéomiques et la détection toujours plus sensible de molécules d'intérêt par exemple dans les fluides biologiques (plasma, urine, LCR).Mon travail de thèse a porté sur le choix et la mise au point de stratégies instrumentales et analytiques en optimisant de façon poussée tous les paramètres du couplage LC-MS et LC-MS-MS. La première partie concerne la mise au point expérimentale de techniques de microLC-MS et microLC-MS-MS pour la caractérisation de composés peptidiques et la mesure de leur biodisponibilité. La seconde partie porte sur le développement, l'optimisation et l'utilisation de la nano-LC-MS pour l'étude protéomique avec une première étude protéomique visant à caractériser les interactions entre le riz et le rice yellow mottle virus. Ce travail a permis par les techniques MALDI-MS et LC-MS-MS, de mettre en évidence les protéines du riz recrutées par les protéines de capside du virus et l'identification des protéines différentiellement exprimées selon la variété de riz (résistant/sensible). La seconde étude protéomique concerne la caractérisation de marqueurs d'expressions liés à l'anomalie "Mantled" chez le palmier à huile faisant appel au séquençage de novo. Pour conclure, nous avons utilisé les multiples potentiels du couplage microLC-MS et nanoLC-MS-MS pour répondre à différents problèmes biologiques. Ces réponses n'ont pu être obtenues que grâce à la mise au point de méthodologie particulière.

Approches et outils pour l'évaluation de l'Exposome

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Book Synopsis Approches et outils pour l'évaluation de l'Exposome by : Aurélie Cortejade

Download or read book Approches et outils pour l'évaluation de l'Exposome written by Aurélie Cortejade and published by . This book was released on 2015 with total page 0 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Ces travaux mettent en avant le développement de méthodes analytiques afin d'évaluer l'Exposome selon différentes stratégies. Une méthode multirésidus sélective permettant l'analyse d'additifs plastiques et de leurs produits de dégradation pouvant être relargués par des emballages plastiques dans les boissons et les aliments, et ainsi être ingérés par l'Homme, a tout d'abord été mise au point. Cette méthode consiste en une extraction de type Stir Bar Sorptive Extraction sur des barreaux à base de dérivés de polydiméthylsiloxane des additifs plastiques ciblés, suivie d'une analyse par chromatographie liquide ultra-haute performance couplée à un spectromètre de masse en tandem de type triple quadripôle. Afin de détecter et quantifier une plus large gamme de contaminants entrant en contact avec l'Homme, une méthode de screening a été développée par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse haute résolution avec un instrument de type QqToF, à partir d'une matrice urinaire. La méthode de screening ciblé, validée selon les recommandations FDA, a permis de quantifier des contaminants appartenant à diverses familles dans l'urine, sans préparation préalable de l'échantillon, à des concentrations de l'ordre du ng/mL. Appliquée à des urines de volontaires, la méthode de screening non ciblé a permis d'émettre de nombreuses hypothèses d'identification de composés après fragmentation MS/MS. La mise en place de tels outils pour caractériser l'Exposome, associée à des études statistiques et bio-informatiques, contribueront grandement à la compréhension des relations de causalité entre les maladies humaines et les facteurs environnementaux.

Dosage du (±)-VX plasmatique libre par chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse en tandem, application toxicologique et approche de la séparation des énantiomères

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Book Synopsis Dosage du (±)-VX plasmatique libre par chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse en tandem, application toxicologique et approche de la séparation des énantiomères by : Charlotte Debouit

Download or read book Dosage du (±)-VX plasmatique libre par chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse en tandem, application toxicologique et approche de la séparation des énantiomères written by Charlotte Debouit and published by . This book was released on 2011 with total page 0 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: De nouvelles méthodes de détection et de quantification du VX (O-éthyl S-(2(diisopropylamino)éthyl) (méthylphosphonothioate)) dans le plasma par chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse en tandem (LC-MS/MS) ont été développées. Après avoir été mise en œuvre en milieu HBSS (rendement > 99%), la méthode d'extraction liquide-liquide de notre composé d'intérêt nous permet d'obtenir en milieu plasmatique un rendement de soixante-cinq pour cent (65%). Cette méthode d'extraction permet d'évaluer la présence de VX dans de très faibles volumes d'échantillons de plasma (entre 20 et 1000 μL), donc dans des volumes compatibles avec des expérimentations sur de petits rongeurs. Cette extraction est suivie d'une analyse par LC-MS/MS en phase 100% organique. Des limites de détection de 0,15 et 0,5 pg/mL (pour 5 μL injecté) sont obtenues respectivement avec l'utilisation de la colonne Allure Biphényl (Restek) et Lux Cellulose-1 (Phenomenex). Afin d'étudier la toxicocinétique des énantiomères du VX dans le plasma, nos recherches se sont ensuite focalisées sur la séparation de ces derniers. Des résultats prometteurs ont été obtenus en utilisant une colonne Lux cellulose-2 (Phenomenex).

La spectrométrie de masse en couplage avec la chromatographie en phase liquide et supercritique

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Book Synopsis La spectrométrie de masse en couplage avec la chromatographie en phase liquide et supercritique by : Carole Reymond

Download or read book La spectrométrie de masse en couplage avec la chromatographie en phase liquide et supercritique written by Carole Reymond and published by . This book was released on 2020 with total page 0 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Ces travaux de thèse ont porté sur la caractérisation de mélanges complexes oxygénés avec l'étude d'échantillons issus de la biomasse lignocellulosique, et de mélanges complexes hydrocarbonés via l'exemple des coupes lourdes pétrolières. La complexité chimique de ces deux types d'échantillon est propre à chacun et provient de multiples facteurs : i) les produits issus de la transformation de la biomasse lignocellulosique sont constitués de composés oxygénés étendus sur une large gamme de polarité, de masse moléculaire mais aussi de concentration, ii) les coupes lourdes pétrolières possèdent des milliers de constituants hydrocarbonés ainsi que des composés soufrés et azotés. Dans les deux cas, l'objectif de ces travaux de recherche est d'améliorer la connaissance de la composition des échantillons, ce qui est indispensable pour développer des procédés de transformation encore plus performants. Pour atteindre cet objectif, des méthodes séparatives adaptées aux propriétés des échantillons ont été mises en place et couplées à la spectrométrie de masse haute résolution (HRMS). Une méthodologie via l'utilisation de plans d'expériences a été proposée afin d'optimiser l'interface entre la dimension de séparation et la HRMS. Dans le cas des échantillons issus de la biomasse, dans un premier temps, le couplage de la chromatographie en phase liquide à polarité de phase inversée (RPLC) et de la HRMS avec une source electrospray (ESI) et une source d'ionisation chimique à pression atmosphérique (APCI) a permis une première description des échantillons. Des expériences de fragmentations successives ont mis en évidence des structures inédites. Par la suite, une méthode de chromatographie bidimensionnelle en ligne (LCxLC) dédiée à l'analyse des composés les plus polaires a été optimisée et couplée à la HRMS. La mobilité ionique (IMS) a également été étudiée afin d'évaluer son intérêt au sein des couplages réalisés. Dans le cas des coupes lourdes pétrolières, une méthode associant la chromatographie de partage centrifuge (CPC) en première dimension, la chromatographie en phase supercritique (SFC) en deuxième dimension couplée à la HRMS avec une source de photo-ionisation à pression atmosphérique (APPI) en tant que troisième dimension s'est révélée être une approche pertinente pour quantifier les hydrocarbures aromatiques polycycliques présents dans les distillats sous vide. Ce couplage hors-ligne de la CPC à la SFC a permis de construire des cartographies 2D organisées selon le degré d'insaturation et le nombre de cycles aromatiques des composés détectés, reflétant la composition détaillée des échantillons investigués. Pour terminer, les avantages et inconvénients de l'ensemble des méthodes développées au cours de cette thèse ont été discutés. Les spécificités des deux spectromètres de masse utilisés (FT-ICR et timsTOF) sont comparées en termes de résolution, vitesse d'acquisition et mécanismes de fragmentation. Une capacité de pics a été évaluée pour chaque couplage, ce qui a permis de les positionner les uns par rapport aux autres en perspective de la complexité des échantillons, du traitement des données et du besoin analytique.

Développement et validation d'une méthode analytique en chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en mode tandem

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Book Synopsis Développement et validation d'une méthode analytique en chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en mode tandem by : Tatiana Martynova

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Développement et mise au point d'une méthode de dosage d'un biomarqueur protéomique par spectrométrie de masse couplée à de la chromatographie en phase inverse

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Book Synopsis Développement et mise au point d'une méthode de dosage d'un biomarqueur protéomique par spectrométrie de masse couplée à de la chromatographie en phase inverse by : Wilfried Garandel

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La quantification ciblée de protéines et peptides par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem

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Book Synopsis La quantification ciblée de protéines et peptides par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem by : Romain Simon

Download or read book La quantification ciblée de protéines et peptides par chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem written by Romain Simon and published by . This book was released on 2012 with total page 0 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: En recherche clinique ou environnementale, les biomarqueurs protéiques présentent un intérêt croissant. Bien que les immuno-dosages restent les méthodes de référence pour leur quantification, les récentes avancées en spectrométrie de masse (MS) font de cette technique une alternative crédible à l'ELISA. Ce travail apporte quelques éléments méthodologiques pour repousser certaines limitations de la MS. D'abord, deux dosages ont été proposés. Celui réalisé chez G. fossarum représente le premier exemple de dosage de la Vitellogénine chez un invertébré par LC-MS/MS. L'un des défis de la méthode présentée est de doser spécifiquement une protéine dans un organisme dont le génome est majoritairement inconnu. Le second dosage concerne les peptides contenant une méthionine. Nous avons développé un protocole d'oxydation des méthionines afin de s'affranchir du biais lié à leur oxydation partielle. Cette méthode a ensuite été appliquée à une protéine impliquée dans la maladie d'Alzheimer (l'Apolipoprotéine E4) dans une cohorte de 673 plasmas. Ce dosage est à ce jour l'une des plus grandes études réalisées par LC-MS/MS et montre toute la robustesse de cette approche. Enfin, l'influence de la phase mobile sur la sensibilité des dosages de peptides a été étudiée : d'abord en phase inverse, où le méthanol est une bonne alternative à l'acétonitrile ; ensuite en HILIC, où les difficultés liées à l'étude d'ions multichargés en milieu majoritairement organique ont été abordées. Les problèmes liés à la capacité de charge des colonnes ont également été soulevés. La chromatographie HILIC reste prometteuse pour la quantification de peptides puisqu'un facteur dix en sensibilité peut être apporté.

Mise au point d'une méthode générale pour l'analyse de composés peu polaires par couplage chromatographie liquide/spectrométrie de masse (CL/APCI-SM)

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Book Synopsis Mise au point d'une méthode générale pour l'analyse de composés peu polaires par couplage chromatographie liquide/spectrométrie de masse (CL/APCI-SM) by : Jean-Gabriel Rousseau

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Mise au point d'un système d'analyse pour la spéciation d'organoétains par chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse à plasma inductif [microforme]

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Publisher : Montréal : Service des archives, Université de Montréal, Section Microfilm
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Book Synopsis Mise au point d'un système d'analyse pour la spéciation d'organoétains par chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse à plasma inductif [microforme] by : Stéphane Ouellette

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Mise au point d'un système d'analyse pour la spéciation d'organoétains par chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse à plasma inductif

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Book Synopsis Mise au point d'un système d'analyse pour la spéciation d'organoétains par chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse à plasma inductif by : Stéphane Ouellette

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Evaluation du couplage entre la chromatographie en phase liquide et la spectrometrie de masse en tandem pour les analyses protéomiques

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Book Synopsis Evaluation du couplage entre la chromatographie en phase liquide et la spectrometrie de masse en tandem pour les analyses protéomiques by : Delphine Pflieger

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Développement et application de méthodes de chromatographie liquide couplées à la spectrométrie de masse à haute résolution pour les analyses métabolomiques et lipidomiques de larges cohortes

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Book Synopsis Développement et application de méthodes de chromatographie liquide couplées à la spectrométrie de masse à haute résolution pour les analyses métabolomiques et lipidomiques de larges cohortes by : Samia Boudah

Download or read book Développement et application de méthodes de chromatographie liquide couplées à la spectrométrie de masse à haute résolution pour les analyses métabolomiques et lipidomiques de larges cohortes written by Samia Boudah and published by . This book was released on 2014 with total page 0 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Le profilage métabolomique global de matrices biologiques dans de larges séries d'échantillon est un enjeu majeur. Dans ce contexte, notre travail vise à développer des approches LC-HRMS et outils bioinformatiques pour les analyses métabolomique et lipidomique de larges cohortes. Dans un premier temps, nous avons développé puis évalué la pertinence de 4 méthodes LC-HRMS dans l'annotation du métabolome/lipidome sérique humain. Ainsi, une base de données spectrales a été implémentée à l'aide de spectres MS, MS/MS et les temps de rétention de composés de référence afin d'assurer l'annotation de jeux de données. La combinaison de méthodes RP, HILIC et PFPP-HRMS a permis l'identification de 266 métabolites et 706 espèces lipidiques sériques répartis sur 20 et 24 classes chimiques respectivement dont 27% d'espèces isomères. Ces outils ont été appliqués, dans un second temps, à la stratification de 78 patients diabétiques. Outre le syndrome métabolique marqué (perturbation du métabolisme énergétique), nos analyses ont montré l'impact délétère de facteurs physiologiques confondants -âge et IMC-. Nous en avons évalué l'influence sur une cohorte de 227 salariés du CEA. Les empreintes lipidomiques sont robustes, néanmoins l'impact de l'IMC est marqué pour les lipides neutres. L'effet du genre démontre un catabolisme masculin important. L'effet de l'âge se manifeste par des activités enzymatiques altérées. Ces études combinent une analyse globale métabolomique et lipidomique des mêmes échantillons humains. Elles visent à construire une base de données relationnelle incluant données spectrales et biologiques servant à la caractérisation de biomarqueurs dans le cas d'études cliniques.

Utilisation de la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse pour l'analyse de médicaments dans les fluides biologiques

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Book Synopsis Utilisation de la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse pour l'analyse de médicaments dans les fluides biologiques by : Didier Patrick Ortelli

Download or read book Utilisation de la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse pour l'analyse de médicaments dans les fluides biologiques written by Didier Patrick Ortelli and published by . This book was released on 2001 with total page 236 pages. Available in PDF, EPUB and Kindle. Book excerpt: Ce travail avait pour buts de déterminer le potentiel de la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse pour l'analyse de médicaments dans les fluides biologiques et de tester de nouvelles techniques de préparation d'échantillons pouvant être couplées à la séparation chromatographique. La méthadone a été employée comme molécule modèle et analysée dans différents fluides biologiques dans le cadre d'une étude clinique. Différentes techniques d'extraction ont été testées. Parmi celles-ci, l'extraction sur phase solide en ligne a été particulièrement étudiée afin d'automatiser et de réduire le temps de l'analyse. Ainsi, les phases à accès restreint ont été testées pour l'analyse de la méthadone et ses métabolites. Finalement, deux applications employant la LC-MS ont été développées. La première concerne le dosage d'un composé antimalarique dans le plasma et la seconde concerne l'identification et le dosage de diterpénoides dans des extraits d'huile de graines de l'épurge.

Chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse

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Book Synopsis Chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse by : Laurent Bismuth

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